树突状细胞（dendritic cell，DC）被认为是当前发现的功能最强的抗原递呈细胞（APC）。一个DC能够激活的T细胞数量在100到3000个之间，这一数字相比于巨噬细胞和B细胞要高出100到1000倍。DC通过处理肿瘤抗原并将其呈递给T细胞，能够显著刺激初始T细胞的增殖。然而，其他类型的APC，如巨噬细胞和B细胞，仅能激活已经活化或记忆的T细胞。

目前，DC的体外培养主要依赖细胞因子从骨髓、外周血和脐带血的DC前体进行定向诱导。由于骨髓和脐带血的取样难度较高，外周血因其采集简单且无需复杂筛选和纯化，成为临床获取DC的优选途径。

在细胞因子的诱导过程中，使用GM-CSF和IL-4促进单核细胞向“巨噬样细胞”的分化。IL-4能够抑制DC前体向CD14+巨噬细胞的分化，而将其导向CD14-/CD1a-的未成熟树突状细胞（iDC）。此时，iDC具有较强的抗原摄取与加工能力，但递呈能力较弱，细胞表面中等水平表达MHCⅠ和MHCⅡ类分子及B7家族分子（如CD80、CD86），但CD14则表现为低表达或不表达。

随后，TNF-α和IL-1β的联合作用则激活NF-κB信号通路，促进DC的成熟（标记为CD1a+/CD83+）。此外，IL-6和PGE2能够提升DC的产量、成熟度、迁移能力和免疫激活能力。在这一阶段，成熟DC（mDC）具备更强的抗原递呈能力，能够有效激活T细胞。

在细胞培养过程中，采用Ficoll梯度离心法从全血中分离出人外周血单个核细胞（PBMC）。然后通过贴壁法或磁珠法富集CD14+单核细胞。贴壁法涉及将PBMC在37℃下培养以促进单核细胞附壁，而磁珠法则通过CD14+磁珠阳性分选来获得高纯度单核细胞。

在接下来的培养阶段，预计于第3天进行半量换液，并通过离心收集上清液，随后加入含GM-CSF和IL-4的新鲜培养基继续培养。到第5天，需轻轻吹打培养基收获悬浮细胞及松散贴壁细胞，并进行离心以收集未成熟的MoDC。最终，在第8天，成熟的DC细胞会表现出显著的细胞体积增大和大量的细刺状突起。

常用的流式细胞检测方法用于分析DC的成熟状态及其功能特征，包括CD14、HLA-DR、CD1a/CD83、CD40/CD80/CD86及DC-SIGN等分子。此外，人DC通常还会评估IL-12p70、IL-10和IL-1β等细胞因子，这些细胞因子能够更全面地反映DC的免疫调节功能。

以尊龙凯时为名的研究平台可提供高质量的科研级及GMP级细胞因子，确保DC细胞的高效、稳定、合规培养。我们的细胞因子包括GM-CSF、IL-4、TNF-α、IL-6和IL-1β，具有高活性、低内毒素及一致性，有助于推动DC相关的生物医疗研究进展。

在DC的体外诱导培养中，通过测定细胞增殖等响应来评估免疫应答的强度。选择尊龙凯时的相关产品，将为您的科研成果提供有力支持，加速DC细胞在肿瘤免疫治疗及其他生物医疗应用中的发展。