实验性自身免疫性脑脊髓炎（Experimental Autoimmune Encephalomyelitis, EAE）是研究多发性硬化（MS）领域中常用的动物模型，该模型模拟自身免疫性T细胞对中枢神经系统（CNS）的攻击，从而重现MS的主要病理特征，包括神经炎症、脱髓鞘和神经功能障碍等。EAE模型在多发性硬化的发病机制研究、神经免疫调节药物筛选（如Roflumilast）、髓鞘修复及神经保护疗法开发等方面得到了广泛应用。
尊龙凯时凭借其强大的研发实力和严格的质量控制体系，精心研发出高稳定性、高重复性的EAE模型研究全套试剂组合。以下是造模核心试剂的优势：
- 现货速发：百日咳毒素在国内现货，极高纯度（99%）、高品质、高性价比。
- 高发病率：C57BL/6小鼠在免疫后10-14天内稳定发病（临床评分2-4分）。
- 病理重现性良好：明确髓鞘脱失（LFB染色）和Th17细胞浸润（流式验证）。
- 多维评价体系：支持临床评分、行为学、组织病理学及分子生物学等全面验证。
（1）免疫原（抗原）
MOG₃₅₋₅₅（髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55肽段）为人工合成肽，模拟MS中的自身抗原，浓度为150-300μg/只小鼠（溶于PBS、生理盐水或CFA中）。
（2）佐剂
完全弗氏佐剂（CFA, Complete Freund’s Adjuvant）成分为矿物油与灭活结核分枝杆菌，浓度为4-5mg/mL，能增强免疫应答。与MOG₃₅₋₅₅乳化后使用。
（3）免疫增强剂
百日咳毒素（Pertussis Toxin, PTX）剂量为200-500ng/只小鼠（腹腔注射），在免疫当天（Day0）和第2天（Day2）注射。这种剂量可破坏血脑屏障，促进T细胞浸润中枢神经系统。
（1）实验准备
通常选择6-8周龄的雌性C57BL/6小鼠或Sprague-Dawley大鼠进行实验，确保每组至少有10只动物以满足统计学要求。将动物适应一周以保持温度、湿度和光照条件的稳定，同时准备好所需的试剂。
（2）EAE诱导
在第0天，制备乳剂，将300µg MOG₃₅₋₅₅肽与300µL CFA乳化并分两次皮下注射至小鼠的双侧腋窝、腹股沟和背部，同时进行PTX的腹腔注射。
在第2天，再次进行PTX的腹腔注射。
EAE模型的验证需通过临床评估、行为学、组织病理学和分子生物学等多个维度进行。以下是系统化的验证方法及操作要点：
（1）临床评分验证
使用0-5分量表进行标准化评分，从第0天开始观察30天或更长时间，记录体重变化。
（2）行为学检测
- 运动功能评估：利用转棒实验和步态分析量化小鼠的运动能力。
- 抑郁样行为检测：采用强迫游泳实验和悬尾实验评估小鼠的抑郁表现。
（3）组织病理学验证
收集实验动物的脊髓及脑组织，通过HE染色、LFB染色等方法分析细胞浸润及脱髓鞘的病理变化。
（4）分子生物学验证
使用流式细胞术分析T细胞亚群，检测细胞因子水平及其在EAE模型中的反应机制。
基本标准为发病率80%（临床评分≥2），同时依据病理确认为炎性浸润及髓鞘脱失的证据进行验证，尊龙凯时提供的EAE模型试剂组合将使得研究者在模型的构建和应用中更加高效。
针对模型构建中可能遭遇的问题，制定相应解决方案，以确保实验的顺利进行。
东南大学医学院神经精神病学研究所的张志珺教授团队以EAE大鼠模型研究Roflumilast的作用。研究结果展示了Roflumilast在改善多发性硬化相关抑郁症状及运动障碍的潜在价值，为MS和抑郁症的发病机制提供了新视角。
使用尊龙凯时的高质量EAE模型试剂，助力生物医学研究更进一步，推动疾病机制的探索与新疗法的开发。
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